ELISA實驗前注意事項

1、 仔細(xì)閱讀說明書。

2、 檢查試劑盒標(biāo)簽上的有效期。如果超過有效期，請勿使用。

3、 按說明書確定所有試劑齊全（數(shù)量、體積）。

4、 標(biāo)本制備要規(guī)范，每份標(biāo)本體積要按2-3個復(fù)孔以上的量制備（貯存），盡量分裝做備份。 短期內(nèi)無法實驗者，注意低溫保存。 

5、 準(zhǔn)備好所有實驗額外所需物品（比如移液器，試管，清洗器，酶標(biāo)儀）。

6、 按說明書將所用試劑平衡至室溫，根據(jù)檢測標(biāo)本數(shù)量確定所需試劑的量。

7、 檢查試劑盒內(nèi)每種試劑的貯存條件，保證所有試劑均按照試劑盒內(nèi)說明書推薦的條件存儲。

8、 檢查不穩(wěn)定或者變質(zhì)的試劑溶液（比如沉淀或變色）。有些試劑，比如標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液或者檢 測稀釋液，可能在設(shè)計時就含有沉淀物。所有試劑在滴入酶標(biāo)板之前，必需充分混勻。而由于沉淀物的特性，在加入酶標(biāo)板之前，必需不停攪拌。

9、 保證充分的孵育時間和溫度。

10、 切勿使用不同生產(chǎn)批號的試劑取代現(xiàn)有試劑或混合現(xiàn)有試劑。

11、 在混合或溶解蛋白溶液時，避免泡沫產(chǎn)生。

12、 在實驗開始之前，安排好實驗流程。

13、 在實驗開始之前，清潔工作臺。

ELISA實驗中務(wù)必注意事項

1、要保證移液槍的準(zhǔn)確性，誤差不能超過2%?？捎盟碗娮犹炱竭M(jìn)行確定。但需要有專業(yè)人員進(jìn)行矯正。

2、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后，要更換槍頭。即使是吸取標(biāo)準(zhǔn)品時。

3、要在實驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出，使各種試劑都恢復(fù)到室溫，以使結(jié)果更穩(wěn)定。

4、ELISA試劑盒實驗時，要使底物避光保存。

5、用槍吸取液體時速度不能太快，以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。

6、吸取液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。

7、將液體加到酶標(biāo)孔中時，避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會自然流下去。

8、液體全部加完后，可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動30秒，混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動功能。

9、應(yīng)盡量做雙孔實驗，這樣才能保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。

10、ELISA試劑盒對結(jié)果有疑問的樣品要用其它方法進(jìn)行確證。